Kao što je ranije spomenuto, autoklav je jednak ekspres loncu. Razlika je u tome što djelovanje na
autoklav je teže.
Instrumenti koji se steriliziraju pohranjuju se u komoru u trbuhu autoklava. Čim se autoklav uključi, gusti oblak pare šalje se u komoru. U ovom trenutku tlak i temperatura počinju rasti. Obično većina autoklava želi održavati temperaturu od oko 120°C (oko 250°F).
Uređaj također uključuje brojne ventile i cijevi koji omogućuju ulazak pare u komoru i usmjeravanje kontaminiranog zraka prema izlazu. Također, nije potrebno primijeniti određenu kombinaciju 120°C i 15 minuta. Ovisno o unutarnjem materijalu koriste se različite kombinacije.
Na primjer, poznato je da autoklavi primjenjuju temperaturu od 134-138°C tijekom 3 minute. Slično, mogu se koristiti i druge prikladne kombinacije.
Ovi uvjeti se održavaju oko 15 minuta, što je dovoljno da se ubiju svi mikroorganizmi i sve spore. Proces uništava unutrašnjost mikroba i učinkovito prekida njegovo postojanje. Nakon potrebnog vremena, para se uklanja i tlak se postupno smanjuje.
Proces se temelji na istiskivanju kontaminiranog zraka u komori zasićenom parom i prisiljavanju te pare da ustraje, tako da produljeno vrijeme izlaganja osigurava učinkovitu sterilnost. Važno je napomenuti da para nije prevruća niti sadrži više od 5% vlage.
